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猴白介素4(IL-4)ELISA试剂盒操作步骤及样本处理

本生(天津)健康科技有限公司   发布时间:2020/11/20 13:45:28

  猴白介素4(IL-4)elisa试剂盒操作步骤及样本处理

  猴白介素4(IL-4)ELISA试剂盒操作步骤:

  1.加入50ul标准品(Standards)、血清标本于相应反应板孔中。

  2.每孔加入100ul酶联物(Conjugate),轻轻混匀30秒(重要),室温60分钟。

  3.洗板:甩尽板内液体,用蒸馏水或者洗涤液(普通洗涤液,自配)洗涤反应板,并去除 水滴(在厚叠吸水纸上拍干);这样反复洗涤5次。

  4.每孔加入100ul显色液,轻轻混匀10秒,室温20分钟。

  5.每孔加入50ul终止液(StopSolution)。轻轻混匀30秒;30分钟内在450nm处读OD值。elisa试剂盒

  样本处理及要求:

  1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

  2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

  3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

  4.,细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

  6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

  7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

  猴白介素4(IL-4)ELISA试剂盒注意事项:

  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物请避光保存。

  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

  8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

  9.本试剂不同批号组分不得混用。

  10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

  猴白介素4(IL-4)ELISA试剂盒操作步骤,本生生物小编就分享到这了,看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧!总的来说,希望对大家有所帮助。

阅读人数:21 原创作者:本生(天津)健康科技有限公司

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