本生ELISA试剂盒实验中加标回收注意事项

　　加标回收确定样品成分对利用抗体进行的抗原检测的影响。例如，组织培养物上清液中所含的多种蛋白可能会阻止抗体的结合，增加信噪比。这可能导致低估目标浓度。

　　将已知浓度的蛋白质加入到样品基质和标准稀释剂中。通过该测定对加标蛋白进行定量分析，并对样品基质和标准稀释剂的结果进行比较。

　　如果结果相同，那么样品基质可视为适用于该测定程序。如果回收率不同，则样品基质中的组分对分析物检测有干扰。

　　ELISA实验加标回收应注意事项

　　1、加标物的形态应和待测物的形态相同。

　　2、加标量应和样品中所含待测物的测量精密度控制在相同的范围内，一般情况下作如下规定：

　　(1)加标量应尽量与样品中待测物含量相等或相近，并应注意对样品容积的影响;

　　(2)当样品中待测物含量接近方法检出，加标量应控制在校准曲线的低浓度范围;

　　(3)在任何情况下加标量均不得大于待测物含量的3倍;

　　(4)加标后的测定值不应超出方法的测定上限的90%;

　　(5)当样品中待测物浓度高于校准曲线的中间浓度时，加标量应控制在待测物浓度的半量。

　　3、由于加标样和样品的分析条件完全相同，其中干扰物质和不正确操作等因素所导致的效果相等。当以其测定结果的减差计算回收率时，常不能确切反映样品测定结果的实际效果。

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