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标签:ELISA 本生 试剂盒 抗原 抗体 酶标记抗体
ELISA实验要点:ELISA实验过程中会遇到哪些问题,如何解决!
高背景信号:
可能原因
洗板不充分; 样品或标准品中含干扰物; 缓冲液受污染;
解决方法
将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分; 确保在洗涤弃掉了所有残留抗体溶液; 设置空白对照; 重新配制缓冲液;
无型号:
可能原因
试剂添加顺序错误或试剂配制有误; HRP被叠氮化合物污染; 抗体用量不足;
解决方法
重复实验; 检查试剂配制方法; 复核试验试剂添加流程; 使用新鲜配制的试剂; 使用推荐的抗体量;
整版呈规则蓝色:
可能原因
洗板不充分或跳过洗板步骤未去除残留的非结合过氧化物酶; 封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染; 缓冲液有金属或HRP污染;
解决方法
严格按照说明书洗涤流程操作; 每步均需使用新的封板膜或试剂储液槽; 配制新鲜缓冲液;
标准曲线不佳梯度不明显:
可能原因
实验操作流程有误 标准曲线稀释计算错误;
解决方法
严格按照说明书操作流程; 重新计算制作新的标准曲线;
板内重复性差:
可能原因
洗板不充分; 重复使用封板胶纸; 未使用封板胶纸;
解决方法
将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分; 每步均需更换使用新的封板胶纸; 需使用封板胶纸;
板间重复性差:
可能原因
洗板不充分; 孵育温度发生变化; 操作流程改变; 封板胶纸重复使用导致HRP残留污染;
解决方法
将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分; 确保已在洗涤弃掉所有残留溶液; 严格按照推荐的温度孵育; 勿在环境温度变化大的地方孵育; 严格按照相同的操作流程; 每一步均使用新的封板胶纸;
Elisa本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
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